發(fā)布時(shí)間: 2022-06-15 點(diǎn)擊次數(shù): 1134次
用過的透析袋保存前需要怎么處理
透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過程中,除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時(shí)都要用到透析的技術(shù),用過的透析袋保存前需要怎么處理?
用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,然后置50%乙醇中保存即可;用完以后,要洗干凈,透析袋也可以保存在0.1%疊氮鈉(可防止微生物生長)里;0.05%-0.1%疊氮鈉,或者1mMEDTA,或者50%甘油中4度保存!
透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為"保留液",袋(膜)外的溶液稱為"滲出液"或"透析液"。透析的動力是擴(kuò)散壓,擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
透析袋的處理:可先用50%乙醇煮沸1小時(shí),再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氫鈉和0.001mol/LEDTA溶液洗滌,用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí)驗(yàn)證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。若長時(shí)間不用,可加少量NaN2,以防長菌。從此時(shí)起取用透析袋要戴手套。洗凈涼干的透析袋彎折時(shí)易裂口,用時(shí)仔細(xì)檢查,不漏時(shí)方可重復(fù)使用。